PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

想請問大家跑蛋白電泳的經驗

看板Biotech (生命科學)作者 (儲備博士)時間19年前 (2006/09/14 22:48), 編輯推噓4(4推 0噓 6→)
留言10則, 7人參與, 最新討論串1/1
到底需要多少量的蛋白質load到SDS-PAGE， 才能在轉漬後可以萬無一失的偵測到band？ 特別是有磷酸化的蛋白？.... 10 microgram是不是過低？(因為細胞不多) 感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.142.116.211
推
09/15 00:02, , 1F
如果是cell lysate 我習慣放30microgram protein
09/15 00:02, 1F
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09/15 00:03, , 2F
如果是purified single protein要做western0.2ug就看得到
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09/15 00:04, , 3F
決定於你的抗體好壞...不知道對你是否有幫助
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推
09/15 00:23, , 4F
transfer抓得好 detect沒煩惱
09/15 00:23, 4F
推
09/15 02:12, , 5F
可以查一下相關的paper 看看別人做你那種蛋白的都load多少뀠
09/15 02:12, 5F
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09/15 09:53, , 6F
20就好 20以上常常會saturate~~~
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09/15 09:54, , 7F
20 microgram
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09/15 10:08, , 8F
看組織或細胞的蛋白質濃度.另外抗體好壞也是重點之ㄧ
09/15 10:08, 8F
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09/15 15:58, , 9F
我覺得15microgram還蠻剛好的..
09/15 15:58, 9F
推
09/15 19:49, , 10F
Substrate也有影響~
09/15 19:49, 10F
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