[求救] run SDS-PAGE速度太慢

看板Biotech (生命科學)作者 (無底洞)時間19年前 (2007/01/08 23:25), 編輯推噓7(702)
留言9則, 6人參與, 最新討論串1/1
請教板上各位高手 我最近在跑SDS-PAGE時發現我的電泳速度太慢 我們家是跑大片膠(13*15) 10%的gel大約跑56V 16hr可transfer 我之前跑都很ok 最近不曉得到底哪裡有問題 跑O/N之後早上來收還剩一大段 衝100V還是要跑個兩三個鐘頭才有辦法transfer 換過running buffer還是一樣 可是acrylamide是新配的而且有借人跑過OK APS也是用之前就配好分裝冰-20的 10%SDS也是之前用過OK的 膠體凝固的速度也正常 看起來也OK WB出來的DATA看起來也是一切正常 markerOK protein看起來也不壞 就是除了跑電泳的速度變很慢之外似乎都沒什麼差異 我唯一想得到的是我的1.5M Tris pH8.8 可能pH值有變 可是重新測過 pH=8.80 也重新過濾 問題還是沒有解決 我在想Tris buffer在調pH值要注意室溫 我們家最近冷氣開很強 室溫都在20度以下 我的Tris buffer是差不多在17度的時候測到pH=8.80 這樣會有差別嗎?????? 或者我還有哪裡沒有注意到的 能否麻煩各位高手指點一下 感激不盡 -- 都跑那麼久了還剩那一大段 那我整天就顧那個PAGE就好了不就什麼事情都不用做 再算個transfer跟做WB的時間 一天根本做不完 生DATA的速度變慢 我皮繃很緊阿>< 嗚~~~到底發生什麼事了阿.....orz -- 曾經發生過的事情 不會忘記 祇是想不起來而已......... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.161.100.164

01/08 23:51, , 1F
看看電路接頭有沒有問題...?
01/08 23:51, 1F

01/08 23:56, , 2F
應該OK 因為大家都用同樣的系統只有我的會這樣
01/08 23:56, 2F

01/09 01:31, , 3F
好像跟我的, 最近也是如此. 我是定電流的, 就加大電流.
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01/09 01:32, , 4F
明天跑完, 再告訴你, 變成如何.
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01/09 06:25, , 5F
檢查一下gel的兩側是否跟spacer密合,有縫隙的畫會造成
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01/09 06:27, , 6F
電壓/電流不從gel通過,於是完全跑不動。
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01/09 11:01, , 7F
定電壓的話 應該會觀察到電流值突然變小.
01/09 11:01, 7F

01/09 13:43, , 8F
我有遇過power supply不夠力的狀況 若有其他台可以換換看.
01/09 13:43, 8F

01/10 01:14, , 9F
不是室溫,也不是buffer的問題,比較像是power supply不夠力.
01/10 01:14, 9F
文章代碼(AID): #15ecA3Sy (Biotech)
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