[求救] run SDS-PAGE速度太慢
請教板上各位高手 我最近在跑SDS-PAGE時發現我的電泳速度太慢
我們家是跑大片膠(13*15) 10%的gel大約跑56V 16hr可transfer
我之前跑都很ok 最近不曉得到底哪裡有問題 跑O/N之後早上來收還剩一大段
衝100V還是要跑個兩三個鐘頭才有辦法transfer 換過running buffer還是一樣
可是acrylamide是新配的而且有借人跑過OK APS也是用之前就配好分裝冰-20的
10%SDS也是之前用過OK的 膠體凝固的速度也正常 看起來也OK
WB出來的DATA看起來也是一切正常 markerOK protein看起來也不壞
就是除了跑電泳的速度變很慢之外似乎都沒什麼差異
我唯一想得到的是我的1.5M Tris pH8.8 可能pH值有變 可是重新測過 pH=8.80
也重新過濾 問題還是沒有解決
我在想Tris buffer在調pH值要注意室溫 我們家最近冷氣開很強 室溫都在20度以下
我的Tris buffer是差不多在17度的時候測到pH=8.80 這樣會有差別嗎??????
或者我還有哪裡沒有注意到的 能否麻煩各位高手指點一下 感激不盡
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都跑那麼久了還剩那一大段 那我整天就顧那個PAGE就好了不就什麼事情都不用做
再算個transfer跟做WB的時間 一天根本做不完 生DATA的速度變慢 我皮繃很緊阿><
嗚~~~到底發生什麼事了阿.....orz
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曾經發生過的事情 不會忘記
祇是想不起來而已.........
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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