[問題] 請問加上His tag DNA sequence 的方法

看板Biotech (生命科學)作者 (春風面紙染秋意)時間18年前 (2007/02/28 16:56), 編輯推噓4(403)
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因為想在病毒的其中一個蛋白質n端加上his tag方便偵測, 要讓病毒在感染複製時都跟著表現, 所以沒法使用表達his tag的載體. 想請問一下大家, 可以直接在primer上加上ATGCAUCAUCAUCAUCAUCAUATG.... 總共約30~35mer的primer ^^^^^^^^^^^^^^^^^^******* 六個HIS的code 病毒蛋白質code 然後做pcr再置換入病毒基因嗎? 另外我注意到更小的tag 是poly-arg, 但是好像比較少人用, antibody 也是his tag的較多, 有其他更小的tag嗎? 大家有什麼看法呢? 請多多指教, 謝謝回答. 大感謝. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.123.86.66

02/28 17:33, , 1F
可以
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02/28 18:11, , 2F
可以 +1
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02/28 21:32, , 3F
用過幾次 都用外加histag的方式
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02/28 21:35, , 4F
不過你可以參考commercial的vector來設計..有些不會用
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02/28 21:36, , 5F
連六個一樣的codon,會在第二四六的第三鹼基上換wobble
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02/28 21:39, , 6F
base, 畢竟一段sequence裡面有太多重覆的 總覺得不大好
02/28 21:39, 6F

02/28 22:36, , 7F
嗯嗯,謝謝各位熱心的回答.要趕快來試試.
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文章代碼(AID): #15vKF9oM (Biotech)
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