Re: [問題] luciferase assay system的internal co …
※ 引述《swiker (呼~)》之銘言：
: 想請問板上各位高手
: 是否有人luciferase assay 是用GFP當internal control
: 因為我lyse細胞之後去測GFP的值都跟background差不多(大概100上下)
: 這樣就幾乎等於沒有表現了..但我luciferase的值非常高
: 所以我去確定我的transfection efficiency不差
: 因為測luciferase activity一定須將細胞lyse完全才能測到較好的值
: 因此懷疑GFP是否在lyse細胞的同時也會失去它的活性
: 請有經驗的高手幫忙解惑
: 謝謝~~~
我也是用EGFP當internal control
GFP的值超高的,並不會因為lysis細胞的步驟而失去活性
建議你在lysis之前先用螢光顯微鏡看一下GFP是否有表現
另一個可能性是你的測量螢光的波長選錯了,GFP是綠光,你可能選到紅光或其它的..
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