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[問題] RT-PCR internal-control gene

看板Biotech (生命科學)作者 (野獸)時間17年前 (2007/06/12 12:15), 編輯推噓7(7推 0噓 4→)
留言11則, 5人參與, 最新討論串1/1
最近在補data，但是跑RT-PCR做出cDNA，再用PCR放大後，internal control怎麼跑都 跑不齊，我跑的internal control是GAPDH，請問除了RNA在定量沒定好之外，還有沒有 別的原因會跑不齊? 因為之前跑都沒問題，所以我在想是不是有東西(試劑)壞掉? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.68.248
推
06/12 14:33, , 1F
請問什麼是跑不齊???
06/12 14:33, 1F
推
06/12 15:00, , 2F
跑不齊是指size不一樣還是強度不一樣?
06/12 15:00, 2F
推
06/12 16:54, , 3F
強度不一樣
06/12 16:54, 3F
→
06/12 16:56, , 4F
不好意思，我的語文能力不太好。
06/12 16:56, 4F
推
06/12 17:27, , 5F
你有做master mix嗎? 會不會是試劑加的量有差異
06/12 17:27, 5F
推
06/13 00:02, , 6F
Master mix 是什麼阿??
06/13 00:02, 6F
→
06/13 00:03, , 7F
是指先把試劑混和在同一管嗎? 我們有這樣做。
06/13 00:03, 7F
→
06/13 00:04, , 8F
定量用不同的分光光度計都做出一致的數據
06/13 00:04, 8F
→
06/13 00:06, , 9F
都到最後關頭，才出問題，唉!!
06/13 00:06, 9F
推
06/13 16:38, , 10F
pcr cycle數多一點可能band強度就會一樣了
06/13 16:38, 10F
推
06/14 12:16, , 11F
但是我已經跑28 cycle，在更高就失去它的準確性了吧?
06/14 12:16, 11F
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