[求救] transfection 效率
請問要如何得知transfection的效率?
緣由
我以同樣的DNA量去transfect一組細胞
藥物處理後4小時收細胞
Run western後發現我transfect的protein量差好多(load相同的protein量)
差異是好幾倍
因為這是我很重要的control(理論上量要一樣)
目前估計應該是我的藥物處理改變了transfected protein的結構
以致於它在western時較易被辨認,而不是我藥物處理造成它表現量變化
可是理論上western時protein已經變性
藥物處理也不太可能影響我transfected vector 的 promotor(有的話也太衰了吧)
請各位板友幫我評估是何種原因?
我想說乾脆不看western
而在藥物處理完後收細胞看transfection效率
如果一樣就ok了
我的transfected protein帶有yfp
可是我不知道要怎樣測transfection效率
好像跑flow可以?
或是co-transfect一個internal control?
希望大家幫幫我
趕畢業急到快哭了
--
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.48.173
→
07/10 11:11, , 1F
07/10 11:11, 1F
→
07/10 11:12, , 2F
07/10 11:12, 2F
→
07/10 11:13, , 3F
07/10 11:13, 3F
→
07/10 14:04, , 4F
07/10 14:04, 4F
→
07/10 14:06, , 5F
07/10 14:06, 5F
→
07/10 14:09, , 6F
07/10 14:09, 6F
推
07/10 15:23, , 7F
07/10 15:23, 7F
→
07/10 15:24, , 8F
07/10 15:24, 8F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章