[求救] 我用adenovirus 做的 recombinant protein size 變大了!@@

看板Biotech (生命科學)作者 (整天吃飽沒事幹)時間18年前 (2007/08/18 23:07), 編輯推噓0(001)
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最近遇到一個大問題, 就是我使用了 Invitrogen 出的 adenovirus kit, 置備我的基因,同時也置備了EGFP 當作control 當病毒都做好了之後,我把病毒拿去感染 NMuMG cell, 然後想要比較感染後不同天數,表現量有無差異, 所以就把不同感染天數的細胞用 RIPA抽蛋白質, 用EGFP的抗體跟我的基因的抗體去hybridize, 結果,神奇的事發生了~ EGFP 的大小從 27kDa 變成55kDa 我的基因也從 37 kDa變成 60~70 KDa, 我後來有用 plasmid transfection的NMuMG 細胞蛋白質做對照, 發現,用plasmid transfection 的蛋白質大小正常, 請問,這是正常的嗎?? 基本上,我的基因是會外泌的,但是我很怕如果是virus genome造成的話, 會不會造成無法外泌或是失去其protease 的活性? 謝謝各位大大,請幫幫我~>< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.166.242.28

08/18 23:07, , 1F
忘了說,我使用的載體是 pAd/CMV/V5-DEST
08/18 23:07, 1F
文章代碼(AID): #16nmil6g (Biotech)
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