[求救] 我用adenovirus 做的 recombinant protein size 變大了!@@
最近遇到一個大問題,
就是我使用了 Invitrogen 出的 adenovirus kit,
置備我的基因,同時也置備了EGFP 當作control
當病毒都做好了之後,我把病毒拿去感染 NMuMG cell,
然後想要比較感染後不同天數,表現量有無差異,
所以就把不同感染天數的細胞用 RIPA抽蛋白質,
用EGFP的抗體跟我的基因的抗體去hybridize,
結果,神奇的事發生了~
EGFP 的大小從 27kDa 變成55kDa
我的基因也從 37 kDa變成 60~70 KDa,
我後來有用 plasmid transfection的NMuMG 細胞蛋白質做對照,
發現,用plasmid transfection 的蛋白質大小正常,
請問,這是正常的嗎??
基本上,我的基因是會外泌的,但是我很怕如果是virus genome造成的話,
會不會造成無法外泌或是失去其protease 的活性?
謝謝各位大大,請幫幫我~><
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08/18 23:07, , 1F
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