Re: [問題] Roche的protease及phosphatase inhibit …
※ 引述《Chelsea911 (England victory)》之銘言：
: 請問板上大大有用過Roche的這兩個產品嗎？
: 效果如何呢？
: 裡面的datasheet只有提到一顆錠劑可以泡成10ml lysis buffer
: 頂多提到如果protease或phosphatase很強的話可以只配成7ml來使用
: 卻無提到這樣子的一個濃度可以抑制多少細胞的 phosphatase 或 protease
: 有大大有經驗可以分享嗎？？
: 另外它的賣點可以在medium中加入...
: 就針對這點而言～這些inhibitor真的能進入胞內嗎？？？
我之前用過
它的protease inhibitor真的好用
我是過用它來處理細胞, 然後lyse掉細胞
跑western blot
這個protease inhibitor是可以block protein degradation
(我那時做的是focal adhesion complex proteolysis)
也就是說, 雖然它是水溶性的
但是因為分子比較小或是其他因素, 它是進得了細胞內的
雖然在壓成錠劑時加了不少固化劑
但是在處理細胞時, 我若沒記錯, 500ug/ml就已經能抑制掉部分的degradation
1 mg/ml基本上是抑制掉幾乎80%以上的protein degradation
我忘了它的錠劑一顆大概多重, 不過當時買一瓶後用了蠻久的
所以是可以再further dilute
phosphatase inhibitor我沒用過, 不曉得它的效能如何
也許其他的網友能分享一下
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