[求救] semi-dry transfer後protein糊掉(western)

看板Biotech (生命科學)作者 (提那豬)時間18年前 (2007/10/16 16:51), 編輯推噓5(503)
留言8則, 5人參與, 最新討論串1/1
我所在的實驗室是用semi-dry的系統transfer protein membrane是PVDF 有時候transfer完會發現protein糊掉 就是membrane上某一區域的marker糊掉 繼續做western的結果,想要看的band也是糊掉(或者甚至消失了) 想請教有沒有人有遇過類似的困擾, 或知道如何避免的? 或是覺得任何有可能的發生原因 可以給我指點指點~~~ 感激不盡~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.125.81

10/16 18:03, , 1F
氣泡?
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10/16 22:13, , 2F
過熱?
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不要加太多methanol (<20%)?
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10/17 01:44, , 4F
氣泡應該是會transfer不完全..糊掉我想應該是過熱
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10/17 01:45, , 5F
BUFFER都先冰等要跑再拿出來..然後把電泳槽埋在冰裡跑
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或是把電泳槽拿去冰箱跑也可以..在不然
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10/17 01:46, , 7F
就用低電壓跑久一點..我看過有人是放冷房用10V跑隔夜的
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10/17 02:33, , 8F
有耶~我看我學姐有幾次也是這樣~不過我想跟樓上講的一樣吧
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文章代碼(AID): #1757kAZ8 (Biotech)
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