[求救]lysis buffer

看板Biotech (生命科學)作者 (日子過的真快阿)時間18年前 (2008/03/10 14:26), 編輯推噓2(201)
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之前打破細胞都用RIPA buffer 因為要做2D 所以lysis buffer改用8M Urea 4% CHAPS 用起來感覺心驚膽跳... 因為很難將細胞打散 細胞會連像成一大條透明鼻涕... 之後放在冷房的摩天輪上一個小時 再離心11500rpm 20min 會發生pellet離不太下來的情形... 想問問大家的經驗 另外想問的是wash buffer原本是使用PBS 但是因為它含有高鹽 我以我改用Tris-sucrose buffer 沒想到離心1500~4000rpm居然無法把細胞離下來 想請問大家做2D都用什麼當wash buffer 謝謝~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.92.59

03/10 14:44, , 1F
通常會黏黏的是因為Genomic DNA的關係,sonication即可解決
03/10 14:44, 1F

03/11 16:37, , 2F
黏黏會不會是因為 8m urea在4度c的關係?
03/11 16:37, 2F

03/11 16:38, , 3F
一般是收完CELL之後再沈澱 沈澱完再回溶在REHYDRATION BUF
03/11 16:38, 3F
文章代碼(AID): #17rDI30L (Biotech)
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