[求救] 螢光免疫染色上面有一團霧
大家好，最近在做螢光免疫染色
不知為何，在confocal的顯微鏡下看起來，我的組織上面總有一大團霧
我是做腦的切片，同事上星期還有做腦的切片但是別的區域
用這個方法及材料都沒有問題
背景直高到跟本沒辦法照相或看到清楚的細胞
只好上來跟大家求救
我是染IB4- texas red
用4% PFA 固定overnight， 染antibody之前有用normal goat serum 做blocking
中間的wash 是用PBS + triton X (0.4%), 封片是用DAKO專門的mounting medium
染色的結果DAPI結果ok, 可是染antibody的就像細胞上面有一大堆雲擋著的樣子
只看到雲下面似乎有細胞
不知道有人有欲過類似的問題嗎？
感謝大家了
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◆ From: 134.76.2.32
※ 編輯: souy 來自: 77.8.161.104 (04/15 01:46)
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