[求救] western做不太出來

看板Biotech (生命科學)作者 (流浪者)時間18年前 (2008/04/20 17:18), 編輯推噓2(200)
留言2則, 2人參與, 最新討論串1/1
不知道怎麼回事 我有在重組蛋白質後面有加上6X his-tag 大小約60kDa 以Ni-NTA His-bind Resin去純化時 有得到很漂亮的單一band 可是拿這個純化後的protein去進行western時 就什麼都沒有 拿學姊之前做的重組蛋白質(也有加上6X his-tag)做positive control 就有出現明顯的目標band 所以 一抗二抗或底片還是基質等材料應該都是沒問題的阿~~ 那為什麼我拿純化成功的蛋白質去做western就什麼都沒有呢? 是我哪裡沒有注意到嗎 希望有把我的疑問點講清楚 煩請各位先進前輩高手指導 謝謝 @___@ -- 人和人之間沒有理解,所了解到的事都是自己的... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.38.171

04/20 22:43, , 1F
跑一下Total Protein的Western 確定一下是不是有表現..
04/20 22:43, 1F

04/21 19:06, , 2F
你的一抗是用anti-His tag antibody嗎??
04/21 19:06, 2F
文章代碼(AID): #182mfSwr (Biotech)
文章代碼(AID): #182mfSwr (Biotech)