[求救] 細胞質/細胞核 蛋白質的分離

看板Biotech (生命科學)作者時間18年前 (2008/04/29 20:56), 編輯推噓4(406)
留言10則, 5人參與, 最新討論串1/1
各位大大好! 想要問,分離細胞質/細胞核的protein之後, 有什麼方法可以檢查是否有分離完全呢? (目前我只有跑過SDS-PAGE,發現protein的pattern不同, 但是某些分子量的蛋白質在質and核的部分都有出現)。 我的目的是在分離之後, 跑Wesern 看我的目標蛋白質有沒有進入細胞核。 查到相關的資料都只有敘述核/質分離的方法, 而沒有檢察是否分離完全的檢查。 此外, 這部分也打算做螢光染色,並以confocal觀察。 想請問一下, 用什麼染細胞核比較清楚呢? 最好是紅色螢光。 如果有什麼冒犯的地方,也請不吝指教。 謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.166.233.14

04/29 22:16, , 1F
有些蛋白質只在cytosol出現 如tublin
04/29 22:16, 1F

04/29 22:17, , 2F
紅色 就PI吧
04/29 22:17, 2F

04/30 00:07, , 3F
核外染tubulin 核內就染histone吧
04/30 00:07, 3F

04/30 00:17, , 4F
除非要看chromatin fraction,不然histone不好extract完全,
04/30 00:17, 4F

04/30 00:18, , 5F
而且PAGE的%可能不在一般常用範圍,會很麻煩
04/30 00:18, 5F

04/30 12:39, , 6F
查到一個HCS CellMask,但核/質都會染上,有人用過嗎?
04/30 12:39, 6F

05/01 14:17, , 7F
核外 tubulin 核內 lamin
05/01 14:17, 7F

05/01 14:20, , 8F
通常paper有分核質的應該都有control才對 再多幾篇吧
05/01 14:20, 8F

05/01 14:21, , 9F
多找幾篇
05/01 14:21, 9F

05/03 00:59, , 10F
謝謝! 謝謝! 我先試試看 ~
05/03 00:59, 10F
文章代碼(AID): #185nhn3O (Biotech)
文章代碼(AID): #185nhn3O (Biotech)