[求救]永遠成功不了的定點突變

看板Biotech (生命科學)作者 (從來都沒叫過我北鼻)時間18年前 (2008/05/07 18:31), 編輯推噓5(505)
留言10則, 5人參與, 最新討論串1/1
各位 大家好 我第一次PO文.... 是這樣的 在下 從去年暑假到現在做了不下二十次的定點突變 但是呢 連一個鬼東西都沒有給我出來 後來發現是我的template在超過95度下會不見..... 這個到底是捨麼原因呢??? 嘆~~~ 小的 已試過 請人代抽plasmid以及換人做做看等方式 似乎 未能找到真正失敗的原因..... 天阿 連老闆都說這種卡到陰的事情他都沒遇過 可以請各位......救救我嗎? 感激不盡 再不行 我就要去求籤了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.22.18.84

05/07 23:14, , 1F
請問什麼叫不見,你怎麼知道不見了,因為我也想知道我的
05/07 23:14, 1F

05/07 23:15, , 2F
是不是不見了
05/07 23:15, 2F

05/08 10:24, , 3F
那個 跑完PCR機器 去跑膠 一個放CONTRAL 一個用SAMPLE
05/08 10:24, 3F

05/08 10:28, , 4F
然後 sample的band不見了
05/08 10:28, 4F

05/08 10:30, , 5F
sample是只有template....跟二次水 跑cycle然後就都不見
05/08 10:30, 5F

05/08 18:10, , 6F
pcr那管全load嗎 還是只是被稀釋了看不到
05/08 18:10, 6F

05/08 18:15, , 7F
拿去transform看看就知道是不是不見啦
05/08 18:15, 7F

05/09 13:52, , 8F
template DNA多大?超過10K就不好做,換taq或把gene換到
05/09 13:52, 8F

05/09 13:54, , 9F
比較小的vector如pUC19,pGEM3Z 再進行突變
05/09 13:54, 9F

05/13 20:15, , 10F
是用site-directed kit嗎?
05/13 20:15, 10F
文章代碼(AID): #188OJkoa (Biotech)
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