[求救] RT-PCR實驗設計一問

看板Biotech (生命科學)作者crazyrange (熱血羽球)時間18年前 (2008/06/02 09:24)推噓0(0推 0噓 1→)

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想請問一下關於作RT-PCR時的實驗設計目前我的實驗需要看到四個基因一個GAPDH 另外三個target gene 因為是做到2重複加上檢體多達60個而我跑一次RT-PCR最多只能跑96WELL 所以想請問一下在進行RT-PCR的時候以下兩種方式那個比較好 1.四個基因分開測（不同病人）：也就是說我一次只看一個基因，最後再按照檢體來源將各結果放在一起計算。好處是一次測一個基因避免操作上的失誤，但是因為同個檢體來源是在不同次實驗中測量不同基因，會不會被爭論有誤差。實驗都是用相同的cDNA。 2.一次測四個基因（同個病人）：也就是說我以檢體來源最為依據，一個檢體同時測量四個基因，這樣可以同時獲得單一檢體的所有數據。當初想說，因為1＆2在加入cDNA時，因為cDNA是同一批，所以是1還是2的作法，在加入cDNA時多少都會有pippeting error所以就想說1＆2沒差。只是如果選擇1的作法，在換新的cDNA時，所有的基因都要重跑一次，因此想問問各位有經驗的大大，對於一次要看多個基因，要如何設計實驗比較好？感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.120.7.114