[求救] 如何精準的定量inclusion body中的蛋白質量?
如題 小弟我最近需要精準的測定測定inclusion body的蛋白質濃度
之前試過先用超音波震盪的方式 來resuspend蛋白 但是 同一樣品 不同時間
測出來的蛋白質 經過調整之後 跑SDSPAGE依舊看起來有明顯量的不同
所以 採用lowry的方式 但事在稀釋液中直接一般加入帶有0.1%SDS的buffer
可是我發現inclusion body確實完全被溶解了 但 後來 BSA測定的標準品 750數值
異常的低 250ug/mL 只有0.024? 不太可能吧! 後續是200ug/mL 0.002
100ug/mL -0.022 50ug/mL -.0086 25ug/mL -0.074
.....
BSA是剛從-80度C 取出後的樣品 應該不太可能有問題 而且我拿了兩管都有類似的問題!
不知道有沒有人測過inclusion body的蛋白質含量 請問要如何測才會準確呢?
謝謝
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