[求救] chromosome dna extration
最近要抽chromosome DNA作PCR
但是抽出來的DNA品質都不是很好 (跑gel會smear)
導致PCR也作不好
想請教各位高手
我的步驟哪裡需要改進的
以下是我的步驟：(我要抽真菌的)
1.取孢子用液態氮磨
2.粉末加入Buffer(含有tris、EDTA、SDS、2-ME)震盪混勻後在65度下作用
3.加phenol混勻
4.離心取上清液加phenol/chloroform 混勻
5.離心取上清液加isopropanol & NaOAc -20度下沉澱
6.沉澱物用乙醇wash
7.乾燥，加TE buffer
想問~~
在磨我的菌體時~是不是不能磨太碎??
是不是第3步驟就不能大力搖了??
還有 最後回溶時加TE會比加2次水 保存來的久嗎??
問題很多~~
感謝大家耐心的看!!!!!
麻煩大家幫我解答一下疑惑了!!
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