[求救] protein表現量的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (等待)時間17年前 (2008/07/17 23:53), 編輯推噓3(304)
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想請問一下 我目前是使用E.coli的表現系統來製造我的蛋白質 方法是(1)5ml先在37度下養16小時 然後 (2)做四十倍稀釋在三十七度下養一個小時 (3)加入阿拉伯糖在三十七度下養六個小時 這種情況下發現某幾個突變種蛋白質的表現量很低(幾乎沒有) 目前嘗試將(2)改為四個小時(3)改為二十五度十五個小時 但是問題似乎沒有解決 不知道各位前輩有什麼方法可以提高蛋白質的表現量嗎? 先跟各位說聲謝了~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.24.253.102

07/18 00:30, , 1F
Expression Time Course ?
07/18 00:30, 1F

07/18 01:01, , 2F
什麼strain和vector?
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07/18 03:00, , 3F
時間或溫度可以怎麼調整呢?
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07/18 03:04, , 4F
我的vector是GFPuv 要表達的protein是GFP
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07/18 08:30, , 5F
是BAD promoter嗎?L-ara加多少?誘導後生長速率有無下降?
07/18 08:30, 5F

07/18 08:32, , 6F
GFPuv基本上不太影響host,隨便都可以生產一堆.....
07/18 08:32, 6F

07/18 08:33, , 7F
就算插到chromosome上,用T7 promoter驅動還是爆綠.....
07/18 08:33, 7F
文章代碼(AID): #18VsiJzE (Biotech)
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