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[求救] 怎麼萃取在BL21裡的質體

看板Biotech (生命科學)作者 (我不難過)時間17年前 (2008/07/21 23:41), 編輯推噓5(5推 0噓 7→)
留言12則, 6人參與, 最新討論串1/1
最近在萃一個載體是在BL21裡面 其實是廠商附的要給我們做negative control 可是一直萃不太出來耶 就是膠片跑出來亮帶都會拖很長 我們是用lysozyme去打破菌 在做的時候感覺菌都沒被打破 請問要如何克服呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.252.17.230
推
07/22 15:51, , 1F
用一般的plasmid extraction kit應該就抽出來了
07/22 15:51, 1F
推
07/23 18:05, , 2F
BL21是low copy 所以看不到band,抽完plasmid後 直接transfom
07/23 18:05, 2F
→
07/23 18:05, , 3F
到別的菌吧
07/23 18:05, 3F
推
07/23 21:23, , 4F
你太武斷了,我常於BL21再確認plasmid,用1~2cc菌液萃取後通
07/23 21:23, 4F
→
07/23 21:24, , 5F
常不需純化就有50~100ng/mcl的濃度,怎會看不到band？
07/23 21:24, 5F
→
07/23 22:22, , 6F
我們萃完還有用限制?去切，可是跑出來都沒東西，所以覺得
07/23 22:22, 6F
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07/23 22:22, , 7F
是沒萃出來的關西
07/23 22:22, 7F
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07/23 22:22, , 8F
酉每
07/23 22:22, 8F
推
07/25 00:48, , 9F
要抽plasmid就用plasmid extraction kit就行了 lysozyme
07/25 00:48, 9F
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07/25 00:49, , 10F
留著抽protein用吧 至少我用BL21覺得它copy number不是
07/25 00:49, 10F
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07/25 00:49, , 11F
最低的~
07/25 00:49, 11F
推
07/26 23:38, , 12F
BL21 最近一直retransform後抽質體再切 濃度都很夠阿.
07/26 23:38, 12F
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