[求救] MTT assay (SH-SY5Y cell line)
第一次使用2*10^5 cells/ml的SH-SY5Y
seed cell四小時後加入sample
結果control組的細胞全都死掉了(呈黃色)
考慮過是不是因為細胞數過多的關係導致control組細胞死亡
所以又分別以1*10^5, 1*10^4 cells/ml不同細胞數做測試
但是control組依然呈現黃色
後來思考過會不會是seeding時間不夠長導致細胞狀況不好
因此延長了seeding cell的時間(8hr)
細胞數為5*10^4 cells/ml
還是同樣結果
我用別的細胞做MTT都不會發生這樣的情形
想請問做SH-SY5Y cell的MTT assay時有哪裡需要特別注意的???
謝謝
基本實驗流程為
1. seeding cell(4-12hr) 含2%血清的medium
2. 加入sample培養12hr 同樣含2%血清
3. 加MTT reagent四小時之後測吸光值
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