[方法] 有關於plasmid supercoil isolation
M13mp18 infect E.coli 之後
進行large plasmid preparation (約為1mg)
會出現一些所要的supercoiled DNA 與不要的non-supercoiled DNA
故須進行分離的處置
其中non-supercoiled DNA
可能會包含 有nick的 有base-lose的 structure有問題的等等而不能形成supercoil
那想問問 是否有除了CsCl2 gradient centrifugation之外的分離方法?
另外相較於一些medi- mini- plasmid extract kit的原理
在剛剛的isolation上是以什麼方式分離的呢?
column的affinity? elute的速度?
有沒有比較推薦的large plasmid extract kit呢?
Thx
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