[求救] 請問protease種類

看板Biotech (生命科學)作者 (專注)時間17年前 (2009/05/26 18:25), 編輯推噓2(207)
留言9則, 3人參與, 最新討論串1/1
如題~ 生產的重組蛋白一直會被切掉 His-tag 對我後續純化很不利 預測出protease的可能切位後 得到結果如下 115: LysN 116: LysC, Pepsin (pH1.3), Pepsin (pH>2), Thermolysin, Trypsin 117: Chymotrypsin-low specificity (C-term to [FYWML], not before P), Pepsin (pH1.3), Pepsin (pH>2), Proteinase K, Thermolysin 118: Proteinase K 我只知道protease分成4大類 1. Metal protease 2 Serine protease 3. Cysteine protease 4. Aspartyl protease 想請問大家 有沒有什麼文獻或是書籍可以查詢protease的種類? 我上網找了很久得到的資訊有限 只知道LysN是屬於metal protease Glutamyl endopeptidase, Staphylococcal peptidase I 是屬於 Aspartyl protease 如果知道這些protease屬於哪一類 我想加入相對應的protease inhibitor去試試看有無改善His-tag斷掉情形 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.74.19

05/26 19:01, , 1F
protease inhibitor cocktail不能用嘛?!比單買便宜吧~
05/26 19:01, 1F

05/26 21:17, , 2F
我記得滿貴的? 上次學姐跟我說多少錢我忘了
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05/26 21:17, , 3F
請問樓上是買哪家? 報價多少呢? 謝謝
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05/27 07:09, , 4F
有沒有可能是His後緊接Met 造成從後面開始translation
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05/27 19:14, , 5F
回樓上 有確定過ORF了 tag後就是stop codon
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05/27 20:44, , 6F
原來是接在C端 你有使用 anti-His 確認 his-tag消失了嗎
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因還有一種可能 native態純化時 his-tag 被藏起來了
05/27 20:45, 7F

05/28 12:49, , 8F
有阿~做過western 之前的學姐有打MS確認斷掉的位置
05/28 12:49, 8F

05/28 12:50, , 9F
原文就是預估出來會切的protease
05/28 12:50, 9F
文章代碼(AID): #1A6yEOk5 (Biotech)
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