Re: [求救] 關於磷酸化的蛋白質
※ 引述《monkey9841 (cc)》之銘言:
: 之前有聽說
: 例如壓p-ERK完的膜 經blocking後及hi ERK的一抗二抗 還可以壓出ERK(total protein)
: 不知這方法是否可行
: 作法是要如何做呢
: 感覺這方法似乎比較偷吃步 不過可以少跑幾片膠阿!!
: 還是說p-ERK跟 ERK 還是要分別跑膠呢
stripping之後先用2d H2O wash
再用TBS/T wash
blocking可用百分比較低的牛奶
hi完一抗二抗就壓得出來了
stripping buffer可以買commercial也可以自己配
有時候效果不好可以稍微加熱(約攝氏50度左右)
會stripping得比較乾淨
其實很多都可以稍作調整
給你參考看看:)
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