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[求救] primary subculture

看板Biotech (生命科學)作者 (......)時間17年前 (2009/06/08 23:16), 編輯推噓6(6推 0噓 2→)
留言8則, 5人參與, 最新討論串1/1
最近在try bone marrow derived MSC 養了一個禮拜多 細胞終於長出來 但要subculture時 遇到一個麻煩 就是怎拆細胞好像不太容易拆 一直黏在dish上 有嘗試加trypsin 3ml作用個五分鐘 但好像只能部分拆 所以 想請問過來人 是否可以提供我這初學者要怎作到更好 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.142.241
推
06/09 07:55, , 1F
Trypsin 作用的時間再增加吧~之前有放過半小時的
06/09 07:55, 1F
→
06/09 07:55, , 2F
不過細胞株不同~XD
06/09 07:55, 2F
推
06/09 08:06, , 3F
細胞株是fibroblast吧~usually within 5 to 15 minutes
06/09 08:06, 3F
推
06/09 09:31, , 4F
Trypsin處理之前先用PBS wash一下細胞，應該會改善
06/09 09:31, 4F
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06/09 09:32, , 5F
Trypsin 3min後，可以試著敲一敲dish的底部，效果更好
06/09 09:32, 5F
推
06/09 23:16, , 6F
trypsin放37Cplate作用也挺有效,聽說老鼠的會比較不好打
06/09 23:16, 6F
推
06/10 19:06, , 7F
敲擊DISH，原液體用力沖刷收集~
06/10 19:06, 7F
推
07/22 23:56, , 8F
37度作用五分鐘比較好cell再trypsin中放太久會傷細胞
07/22 23:56, 8F
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