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[求救] cDNA需要做純化測濃度才準嘛!?

看板Biotech (生命科學)作者 (朋友看太重的猫)時間17年前 (2009/06/09 14:18), 編輯推噓2(2推 0噓 4→)
留言6則, 3人參與, 最新討論串1/1
其實是個小問題啦 將mRNA經RT轉出的cDNA~是否要先經過處理(例如RNase H把RNA切光光)後~ 再去測cDNA濃度~值才會比較精準可信呢?! 還是大家都是直接把跑完RT的那個mixed product直接去測濃度呢?! 感謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.93.165
推
06/09 15:35, , 1F
我們cDNA沒有在測濃度的耶
06/09 15:35, 1F
→
06/09 16:08, , 2F
由於接下來的cDNA要拿去做semi-Q~所以需要做定量~
06/09 16:08, 2F
→
06/09 16:08, , 3F
雖然在一開始的mRNA就已經做過定量了~但發現cDNA的量還是
06/09 16:08, 3F
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06/09 16:09, , 4F
會有些差異~所以再做一次定量
06/09 16:09, 4F
推
06/09 20:14, , 5F
你轉cDNA的時候加入的dNTP會干擾最後定量, 建議你盡量用同一批
06/09 20:14, 5F
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06/09 20:15, , 6F
等量mRNA轉出的cDNA去作QPCR,最後再以internal control修正
06/09 20:15, 6F
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