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[求救] 有花紋的Polyacrylamide gel

看板Biotech (生命科學)作者 (天涯宦遊人~)時間16年前 (2009/06/18 18:30), 編輯推噓10(10推 0噓 13→)
留言23則, 11人參與, 7年前最新討論串1/1
不曉得各位是不是有同樣的經驗? 就是在下膠凝固後, 會看見膠裡呈現不規則的水紋 (波浪狀) 這些水紋不是集中在下方, 會遍及整片gel 學姊告訴我她從來沒看過這種gel @@ 有沒有知道原因可能是什麼? 我們重配Tris (pH=8.8), 把水和Tris都過濾了 acrylamide是買來的, 29:1, 開新的一罐來用, APS是現配, TEMED也是買來沒多久的 @@ 最後連玻璃片都拿新的 配好的膠放在60度裡加熱一陣子 但仍然會有花紋出現 orz 拜託大家了 orz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.52.144
推
06/18 19:12, , 1F
有汽泡??
06/18 19:12, 1F
推
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有漏膠的現象嗎？
06/18 19:18, 2F
推
06/18 19:20, , 3F
細胞的media過濾後好像pH會改變..Tris不知會不會改變?
06/18 19:20, 3F
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06/18 19:22, , 4F
配膠的混合物是左右混勻?還是用Vortex?還是用燒杯+stir?
06/18 19:22, 4F
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06/18 19:24, , 5F
有沒有仔細的擦乾淨玻璃?? XD
06/18 19:24, 5F
推
06/18 19:42, , 6F
應該不會影響band的形狀吧? 我的確會在16％以上常看到這樣
06/18 19:42, 6F
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06/18 21:06, , 7F
沒有氣泡, 且漏的狀況不明顯(拆膠時不會有多的膠在玻璃外)
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不敢說完全沒漏 @@
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混勻是用vortex, 在50ml 離心管中配
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有仔細擦玻璃 XD
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band會被影響, 我染Coomassie blue時發現會彎曲
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06/18 21:08, , 12F
在重配之前所使用的Tris是沒有過濾的, 但也會有同樣情形
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06/18 21:47, , 13F
那是漏膠 半凝時被拉扯產生的氣泡.....
06/18 21:47, 13F
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06/18 21:51, , 14F
不要vortex,TEMED的量加倍,可以的話抽一下真空,試試看
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嗯嗯 我會試試看的!! 感謝各位!!
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推
06/18 22:15, , 16F
有圖可以看看嗎?
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06/20 17:24, , 17F
我沒有拍下來耶 orz
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後來用parafilm封底+抽真空就變得很漂亮了~~清澈透明!!
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感謝各位~~~~
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06/20 23:15, , 20F
請問什麼是抽真空? 做SDS-gel怎麼抽真空?
06/20 23:15, 20F
推
06/21 08:56, , 21F
可能是混的太過頭了，把氣泡也混進去，所以degas就好了
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11/11 01:32, , 22F
應該不會影響band的 https://muxiv.com
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01/03 16:56, 7年前 , 23F
嗯嗯 我會試試看的 https://noxiv.com
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