[請教] 抽核蛋白跑western blot
根據大家的回答
已經抽核蛋白來跑western blot
但今天壓片訊號很弱
不是抗體的問體
因為以lysis buffer收的sample相當亮
我loading的量約36ug~43ug的protein
但是一次抽到的量也才50ug左右
想請問有抽核蛋白去跑western的人
大約loading多少?
核蛋白壓片會比較難壓嗎?
以往loading 40ug以上就亮到要迅速感光了
但這次背景很深才有明顯的band
天啊~~data再補不完口試也掛了啦>.<
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.136.197.6
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06/27 01:52, , 1F
06/27 01:52, 1F
我有加sample buffer一起煮
好像是細胞掛了就壓不到我要的protein的樣子
時間點不對就掰了
另外，請問大家是用哪一家的kit呢?
目前用BioVision，但是收的過程要一個小時半才完成
想知道有沒有人是用別家的可以交換一下情報嗎~~ 感謝~~
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06/27 09:15, , 2F
06/27 09:15, 2F
lab不是做這方面，沒有買p+，要壓五分鐘才看得見，我load 40ug左右，我覺得還好
至少壓得出來，只是抽到的量只夠跑一次就很頭痛>.<
推
06/27 09:25, , 3F
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06/27 09:26, , 4F
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to t同學，我是壓NFkB，核外應該一定會有吧??這要怎麼看有沒有抽好咧?
※ 編輯: pearls 來自: 122.116.113.223 (06/27 14:46)
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06/27 20:59, , 5F
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推
06/29 21:59, , 6F
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06/29 22:22, , 7F
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