[求救] 請問Northern blot的internal control如何一致

看板Biotech (生命科學)作者 (天才小p)時間16年前 (2009/07/06 00:25), 編輯推噓0(002)
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最近在做Northern的實驗 要比較藥劑處理後跟對照組的差別 可是在跑RNA gel時都不能有效的將28s rRNA跑好 讓每個處理的亮度(濃度)相當 在事前已經先使用過A260/A280定量過了 可是算出來的量就是跟跑膠後的不同 依照照膠系統的定量重新跑膠也不準 看前面的文章,有人似乎是用肉眼去抓條件,然後一直跑到OK為止 但是RNA sample也不是很多(一次還要load 20ul)這樣下去很浪費 就可能只能做一個基因就沒搞頭了,不知道有沒有什麼可能的改進方法 還有有人有嚐試過Reprobing的動作嗎,目前試驗室這個還沒試出來 現在跟學長頭都抱著燒了 麻煩好心人士指點迷津~~@@ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.196.126

07/06 00:41, , 1F
reprobe不會很難,重點是不要讓membrane乾掉
07/06 00:41, 1F

07/06 00:42, , 2F
通常0.1%SSC/1%SDS 80-90deg 10min就足以去除掉大部分的訊號
07/06 00:42, 2F
文章代碼(AID): #1AKDG9jx (Biotech)
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