[求救] 可接Promoter之螢光質體!!

看板Biotech (生命科學)作者 (BEE)時間16年前 (2009/07/10 20:41), 編輯推噓2(203)
留言5則, 3人參與, 最新討論串1/1
現在在做有關於Promoter方面的研究 -- 原本根據之前學長自己重新構築的螢光質體設計帶有 EcoRI及NcoI切位的primer 獲得promoter序列後做了Restriction double digest 在學長構築的質體(同樣可以用酵素把他舊有的promoter切下,打算接我自己的) 但卻發現自己先前沒注意到還有一個EcoRI切位剛好完整的把EGFP切掉 也就是 -----EcoRI-舊Promoter-NcoI-EGFP-"EcoRI"-----(環狀) 自己有試過用partial digest切過~沒用的很好 (但每次都這樣有點麻煩) 所以想徵求可接promoter的螢光質體 像是pmaxFP-yellow-PRL vector等 或是有好的解決方法 謝謝! Orz (有爬文看到突變序列產生新的切位或改變切位,想說還是先請教各位) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.84.225

07/10 21:05, , 1F
promoter前面應該不只有一個切點 原PO可再查一下
07/10 21:05, 1F

07/10 21:07, , 2F
若沒有就先用EcoRI整段切下 接到其他質體上
07/10 21:07, 2F

07/10 21:09, , 3F
做切點置換 增加切點總類 再送回原質體
07/10 21:09, 3F

07/12 13:52, , 4F
謝謝a大的指教~接質體增加切位是個好方法
07/12 13:52, 4F

07/16 18:14, , 5F
將後面的RE切位以定點突變換掉使之為其他序列??
07/16 18:14, 5F
文章代碼(AID): #1ALpS3pF (Biotech)
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