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[求救] 請問 PC12 細胞株冰凍方法 (以爬文)

看板Biotech (生命科學)作者 (tombow )時間16年前 (2009/08/20 17:39), 編輯推噓5(5推 0噓 8→)
留言13則, 8人參與, 7年前最新討論串1/1
小妹我細胞冰凍保存常失敗 細胞一解凍似乎都活不了 使用的 medium 為 RPMI1640 + 10%HS 與 5%FBS 細胞冰凍液為 medium + 7% DMSO 4 度C 30分鐘 -20 度C 再 30 分鐘 置於抗凍盒後 -80 over night 細胞再次解凍後都活不成 想請問有各位先進養過一樣的細胞嗎!?~ 可以分享一下訣竅 代 po 回信請至 youngying 謝過先了 \ ^ ^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.93.56
推
08/20 19:15, , 1F
先確定細胞狀況好再凍~另建議冷卻時間可拉長 serum放多點
08/20 19:15, 1F
推
08/20 20:58, , 2F
改成純FBS+10%DMSO 應該就沒問題了, 個人經驗
08/20 20:58, 2F
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08/20 22:32, , 3F
冷凍前細胞培養不能長太滿，約8分滿
08/20 22:32, 3F
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08/20 22:33, , 4F
media加10~20%FBS可抗氧化
08/20 22:33, 4F
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08/20 22:33, , 5F
DMSO常溫下有毒，所以速度要快
08/20 22:33, 5F
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08/20 22:34, , 6F
4度後直接到-80
08/20 22:34, 6F
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08/22 18:32, , 7F
我有漸凍盒後都直接丟-80
08/22 18:32, 7F
推
08/22 20:44, , 8F
原PO-80之後 不放液態氮?
08/22 20:44, 8F
推
08/24 01:17, , 9F
想問一下你加DMSO的操作步驟?
08/24 01:17, 9F
推
09/07 20:39, , 10F
我也用純FBS+10%DMSO,解凍後都很OK
09/07 20:39, 10F
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11/11 01:41, , 11F
冷凍前細胞培養不能長太 https://muxiv.com
11/11 01:41, 11F
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01/03 17:00, 7年前 , 12F
m
01/03 17:00, 12F
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01/03 17:00, 7年前 , 13F
edia加10~20 https://muxiv.com
01/03 17:00, 13F
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