[問題]關於PRIMER設計和BLAST的問題
不好意思想請問各位我步驟上哪邊有問題
因為今天設計的PRIMER去BLAST都是很多HIT啊XD
首先
找特定GENE~選其CDS序列丟入pick primer
選好product size後~tm值分別是 min 53 opt 56 max 59
DATABASE選第一個~然後pick
pick出來的再丟到blast比對
一次丟一條forward或reverse(也就是分開丟)
database選human g+t
program選megablast
然後就讓他跑~
但每次出來都是好幾百條hit啊@@"
是我哪邊勾選錯誤嗎?
blast時f和r一起放我也試過了
但不太清楚是哪邊的問題
麻煩各位了!謝謝!
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