[方法] 定點突變的cycle數錯了

看板Biotech (生命科學)作者 (期待過一天)時間16年前 (2009/08/30 16:37), 編輯推噓2(201)
留言3則, 2人參與, 最新討論串1/1
最近我使用stratagene的Quick change site directrd mutaganesis kit 來做定點突變 裡面有建議若是single A.a change跑PCR的cycle數是16 但我很糊塗的弄成cycle數12(為point mutation的condition) 跑完PCR之後用DpnI酵素切後跑膠還是有band 於是我拿去transform 只長了一顆colony 挑起來送定序卻定不到 有可能是我PCR cycle數出錯的關係嗎 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.129

08/31 00:36, , 1F
cycle多一點可以多長出一些colony給你選擇去定序
08/31 00:36, 1F

08/31 00:37, , 2F
但是突變成功的機率應該跟cycle無關~~
08/31 00:37, 2F

08/31 16:14, , 3F
多試幾次看看..我也曾只長一顆就挑中的記錄..
08/31 16:14, 3F
文章代碼(AID): #1AcZeuc0 (Biotech)
文章代碼(AID): #1AcZeuc0 (Biotech)