[方法] 定點突變的cycle數錯了
最近我使用stratagene的Quick change site directrd mutaganesis kit
來做定點突變
裡面有建議若是single A.a change跑PCR的cycle數是16
但我很糊塗的弄成cycle數12(為point mutation的condition)
跑完PCR之後用DpnI酵素切後跑膠還是有band
於是我拿去transform 只長了一顆colony
挑起來送定序卻定不到
有可能是我PCR cycle數出錯的關係嗎
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