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[求救] DNA fragmentation 做不出來

看板Biotech (生命科學)作者 (呆瓜小笨豬)時間16年前 (2009/10/29 02:34), 編輯推噓4(4推 0噓 14→)
留言18則, 6人參與, 7年前最新討論串1/1
我們家BOSS從以前開始就一直想要有 Apoptosis positive control 但是不管我們用什麼方法 還是做不出來 像是把細胞拿去無菌操作台照UV(照了7天吧...活的好好的= =) 還是一般常見的H2O2(濃度上到1M了~細胞還是不會飄) 或是用會誘導凋亡的藥物(會抑制依賴Ca2+蛋白的活性) 拿去跑DNA電泳都是一條白白的(大約1kb)在那邊 就是不會有整管白的出現 最近也買了Caspase 3 的kit 也是什麼出現凋亡的現象 細胞的培養環境是在5%FBS的DMEM 細胞從Hep G2到NRK還是A549 全部都試過都沒有 跑PARP還是Bcl-2 或是抽Cytochrome C 通通沒有反應! 我都在想說我們家是不是可以轉行去研究抗老化了= = 細胞到我們家就是不會掛(翻桌) ~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.122.217.173
推
10/29 07:17, , 1F
隨便買個會在S phase造成DNA damage的CPT或DOX加下去
10/29 07:17, 1F
→
10/29 07:18, , 2F
10uM管他哪種細胞都掛
10/29 07:18, 2F
推
10/29 11:42, , 3F
加 Nocodozole
10/29 11:42, 3F
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10/29 14:50, , 4F
....你家細胞真厲害
10/29 14:50, 4F
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10/29 19:28, , 5F
時間點!?...以前實驗室的結果超過時間點也看不見成果了
10/29 19:28, 5F
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10/29 19:28, , 6F
但抓對時間點做出一大條樓梯啦~!
10/29 19:28, 6F
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10/29 21:59, , 7F
S期的藥也試過..細胞一樣會掛但是DNA跑不出來(會分成2條)
10/29 21:59, 7F
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10/29 22:01, , 8F
時間點的話...這是個好建議(筆記)之前是做1.2.5.10.12.24hr
10/29 22:01, 8F
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10/29 22:02, , 9F
但是都沒有出現想要的結果..最近改用Kit來抽也是沒有抽到
10/29 22:02, 9F
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10/29 22:05, , 10F
今天跑PI結果也是沒反應..明天再試試用Annexin V染看看
10/29 22:05, 10F
推
10/29 22:09, , 11F
有AV當然跑AV....ladder是個人認為最粗糙的方法..
10/29 22:09, 11F
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10/29 22:09, , 12F
註：Taxol 1mM細胞也沒掛(丟25T)
10/29 22:09, 12F
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10/29 22:10, , 13F
M phase的藥到底是不是apoptosis見仁見智..
10/29 22:10, 13F
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10/29 22:11, , 14F
只是本實驗室的那台流產細胞儀以經快變高級坐椅了= =
10/29 22:11, 14F
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10/29 22:13, , 15F
可以請教一下CPT跟DOX的全名嗎
10/29 22:13, 15F
推
10/29 22:19, , 16F
Camptothecin Doxorubicin
10/29 22:19, 16F
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11/11 01:48, , 17F
M phase的藥到底 https://daxiv.com
11/11 01:48, 17F
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01/03 17:02, 7年前 , 18F
但是都沒有出現想要的結 https://daxiv.com
01/03 17:02, 18F
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