[求救] BSA或奶粉做blocking?

看板Biotech (生命科學)作者 (蕾兒)時間16年前 (2009/11/05 12:24), 編輯推噓6(6017)
留言23則, 10人參與, 7年前最新討論串1/1
我想請問 我在看PAPER會看到有人使用BSA或奶粉來當作blocking溶液 也有人使用Tween-20 為什麼呢? 它們的運用機制是什麼呢? blocking的意思是??? 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.107.165.134

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BSA 或 non-fat milk 是蛋白質
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Tween-20 是 detergent 去除 non-specific binding
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有用Tween-20 blocking的? 不是拿來wash而已嗎
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我們奶粉是泡在PBST裡面
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※ 編輯: q666 來自: 120.107.165.134 (11/05 15:21)

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拿tween-20 blockingXDDDD 你應該看錯吧
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我看過兩種說法,其一是blocking千萬不要加tween-20
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不然background會很高,另一種說法是如果background太
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高的話,就在blocking中加入tween-20 所以我也有點想
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知道到底要不要加
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通常是用5%milk做blocking, 如果是phosphorylated protei
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改用5%BSA, 用Tween來block這我還是第一次聽說過
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PBST 有加 Tween 20 呀
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不過應該是避免 over-block 的問題吧
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blocking 的目地是因為 PVDF membrane會跟我們的蛋白以及抗
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體結合 所以壓片或呈色的時候就會整片都是
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所以就要利用大量不會被抗體辨認的蛋白把膜上不是我們蛋白質
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所在的地方覆蓋住 讓抗體不會隨變黏在 PVDF membrane 上
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奶粉泡在PBST裡面+1
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不同公司的AB用不同的buffer泡 我們實驗室至少有用TBST
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PBST 以及TNET來針對不同公司的AB下去配blocking
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確實有用Tween 20做blocking的protocol唷...
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不同公司的AB用不同的 https://muxiv.com
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01/03 17:03, 7年前 , 23F
確實有用Tween 2 http://yofuk.com
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文章代碼(AID): #1AybDYpj (Biotech)
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