[求救] RNA濃度太高 會影響RT效率嗎?

看板Biotech (生命科學)作者 (tRoMboNe pLaYer)時間16年前 (2009/12/19 18:08), 編輯推噓1(104)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 想要請教板上的各位先進 我使用的是 promega的AMV reverse transcriptase 之前使用上沒有問題 但是這一次不知道為什麼 轉完RT之後 只能放出18SrRNA的片段 卻沒辦法放出目標基因 這組primer基本上已經用過很多次了 原則上不會有問題 仔細一想 唯一有問題的地方似乎就是 RNA濃度有點高 2046ng/ul 我總共用了10ul也就是20460ng 然後只加1ul的AMV不知道 有沒有人碰過類似的問題~ 感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.241.123.131

12/19 18:29, , 1F
建議可以先看看RTase的說明書~
12/19 18:29, 1F

12/20 00:38, , 2F
RT之前不是應該知道RNA濃度 再定量去轉嗎
12/20 00:38, 2F

01/05 12:34, , 3F
2046還好吧..20460就有點高了...
01/05 12:34, 3F

01/05 12:36, , 4F
primer是random還是target primer 還是oligo dT?
01/05 12:36, 4F

01/12 21:59, , 5F
2ug剛好
01/12 21:59, 5F
文章代碼(AID): #1BBAOKX1 (Biotech)
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