[求救] trypan blue 存活率

看板Biotech (生命科學)作者 (JPG)時間16年前 (2010/02/06 16:22), 編輯推噓4(404)
留言8則, 6人參與, 最新討論串1/1
因為實驗需要算細胞的存活率(HepG2) 我們是用trypan blue來做初步的存活率計算 但我有個疑問... 因為HepG2是屬於貼附型的細胞 而將細胞收下來前會先將medium抽掉 再用PBS來wash 2次 後在用trypsin將其打下 最後再用含有血清的medium中和 而後取20 ul出來算存活率 我的問題是...在PBS wash的那個步驟不就將很多死細胞沖掉了? 那存活率還準嗎?? 今天在用藥物處裡後發現在3cm dish中看起來死的非常多 很多細胞在飄... 但收下來用trypan blue算出的存活率卻高達95% 所以才想到這個問題 麻煩有做過的可以幫忙解答一下 謝謝^^ -- ▲▲ ◣東方project系列 > < ◣ ◢  ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ◤▎ ◥◣持續推廣ing | | ██> 少女受虐中... ψ涼宮 域 gbwind ◢ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.37.162

02/06 18:47, , 1F
因為在PBS就被洗掉了.....
02/06 18:47, 1F

02/06 18:48, , 2F
現在有很多試劑可以看存活率 考慮一下吧
02/06 18:48, 2F

02/07 01:44, , 3F
SRB assay挺方便的 比較沒上述的損失問題
02/07 01:44, 3F

02/07 02:46, , 4F
WST-1 MTT XTT~
02/07 02:46, 4F

02/07 15:19, , 5F
計算方式不對吧? 你要以medium組的細胞數為100%
02/07 15:19, 5F

02/07 15:19, , 6F
treatment組細胞數除以medium組細胞數 這樣就可以啦
02/07 15:19, 6F

02/07 21:01, , 7F
去medium時把漂浮的細胞也收下來
02/07 21:01, 7F

02/08 00:40, , 8F
同 bigrat大
02/08 00:40, 8F
文章代碼(AID): #1BRIRN-R (Biotech)
文章代碼(AID): #1BRIRN-R (Biotech)