[求救] JC-1 測定粒線體膜電位實驗
看板Biotech (生命科學)作者daniel2806 (Tomorrow is another day)時間16年前 (2010/03/24 14:25)推噓1(1推 0噓 0→)留言1則, 1人參與討論串1/1
最近再作貼附型細胞測定粒線體膜電位
我使用的是JC-1染劑
正常粒線體膜電位情形下, 細胞應該呈現同時發綠光和紅光
而粒線體膜電位被破壞後, 細胞僅呈現綠光
問題來了
實驗步驟如下:
我將細胞seed在12 well overnight後
先加入JC-1染色30 min
再加入cccp 100uM (已知的positive control) 處理30 min
然後把細胞用trypsin-EDTA打下來
使它懸浮後 PBS wash
上flow分析
但是
我的無處理的細胞它的膜電位都呈現被破壞的現象 (有一半僅呈現綠光)
反而加入cccp的組別 粒線體膜電位相對比較高
.....這令我困惑.....
我想是不是trypsin-EDTA會影響細胞的膜電位??
有甚麼辦法解決??
拜託了~~廣大的鄉民!!!!
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推
03/24 18:36, , 1F
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