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[求救] 不會破的透析膜=.=

看板Biotech (生命科學)作者 (乎哩乎哩￾ N￾ N￾ )時間16年前 (2010/06/04 17:32), 編輯推噓4(4推 0噓 17→)
留言21則, 6人參與, 最新討論串1/1
版友們有沒有推薦哪家廠牌的透析膜阿? 我們家用orange scientific的35k MW透析膜 用80%硫酸銨沉澱完要過Ni-NTA agarose 所以把protein用lysis buffer回溶並且對lysis buf.透析1L x 3 times 但已經發生好幾次破洞了(裂開一條縫,protein跑光光) 即將被透析膜逼瘋 搞不懂是我手殘還是protein特性? 還是透析膜有問題? 有其他人有類似的經驗嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.80.100
推
06/04 17:49, , 1F
抽的時候太暴力了?!
06/04 17:49, 1F
→
06/04 17:51, , 2F
樓上是說抽?...哪個步驟?
06/04 17:51, 2F
推
06/04 18:10, , 3F
我用同廠牌 10K的很OK阿 還可以回收用三次 XD
06/04 18:10, 3F
→
06/04 20:59, , 4F
pierce的snakeskin不錯喔~
06/04 20:59, 4F
推
06/04 21:14, , 5F
很多透析膜的材質是cellulose 如果你的protein是cellulase
06/04 21:14, 5F
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06/04 21:15, , 6F
就有可能把透析膜digest 我之前是這樣…
06/04 21:15, 6F
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06/04 21:38, , 7F
樓上利害...我的酵素的確是跟細胞壁分解有關的...
06/04 21:38, 7F
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06/04 21:39, , 8F
但不確定他有沒有cellulase的活性...我check一下透膜成分
06/04 21:39, 8F
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06/04 21:41, , 9F
另外想問有沒有可能因為高濃縮的protein 在透析時進入
06/04 21:41, 9F
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06/04 21:42, , 10F
太多水分 使膜被撐破的可能? 每次透析完膜都都很脹說...
06/04 21:42, 10F
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06/05 00:22, , 11F
stir太快被轉破也是有發生過=w=
06/05 00:22, 11F
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06/05 01:34, , 12F
我轉速都給他開到不會有漩渦...速度應該是頗慢..
06/05 01:34, 12F
推
06/05 17:35, , 13F
把透析膜撐破是不太可能 因為濃度會達到動態平衡
06/05 17:35, 13F
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06/05 17:37, , 14F
看來真的是你的protein的特性問題 細胞壁的成分也是
06/05 17:37, 14F
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06/05 17:38, , 15F
cellulose 我覺得你可以試著在低溫的環境下透析 降低你的
06/05 17:38, 15F
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06/05 17:39, , 16F
protein活性 透析膜比較不會被digest
06/05 17:39, 16F
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06/06 14:47, , 17F
感謝chuppx大 我的蛋白是木質分解酵素 對不同於cellulose
06/06 14:47, 17F
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06/06 14:48, , 18F
的醣類鍵結做水解...看來他也是有cellulase活性..@@
06/06 14:48, 18F
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06/06 14:49, , 19F
我都在4度c做透析..per 1L buf./6hr 共3次18hr..
06/06 14:49, 19F
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06/06 14:51, , 20F
換第二次或第三次就有破洞..看來低溫還是無法抑制活性
06/06 14:51, 20F
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06/06 14:51, , 21F
但我真沒注意到透析膜成分...看來得換別種材質了><
06/06 14:51, 21F
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