Re: [求救] 請問期刊內提到的老鼠跪求回答2000P幣~
: 1.frt/frt跟fl/fl 有甚麼不同?
: (大概知道fl/fl是knockout基因的模式)
frt 是指frt-flp system,就類似於cre-Lox,前者從yeast中發現 後者從phage發現
而fl 應該就是指Floxed, flanked by loxP sites ,就是一般的Cre-Lox
例如:http://ppt.cc/,VUT
: 2.lsl代表 lox-stop-lox這個cassette,那跟一般的Cre-Lox系統有甚麼不同呢?
Lox-stop-lox 是在中間有stop code,無cre蛋白時無法轉錄到下面exon
而本篇krasLSLG12D,代表kras是突變型 第12個位置 由G置換成D,
如圖 http://ppt.cc/soIk
而一般cre-lox 是直接 以 LoxP 夾target gene,例 loxp-gene-loxp
當有cre時把此gene給剔除掉(一般只剔除start codon or exon一段)
: 3.一般在做這種多重基因變異的老鼠,像本篇是分別訂購3個品系的老鼠
: KrasLSL12D; p53frt/frt; p16/p19fl/fl
: 之後將牠們雜交取得混合種之後,以內含表現FLPe和Cre兩種重組酶的adenovirus感染
: 以取得conditional knockin/out的老鼠,藉以表現特殊的癌症病徵,再做接下來的試驗
: 想請問的是:
: 這種多重基因變異的老鼠每一隻都會表現出癌症的病徵嗎?如果沒有大概是多大的機率?
: 而如果不會每一隻都表現,但他們理論上有相同的基因組,為什麼?
: 問題很多@@" 但對動物實驗實在是很苦手...感謝各位版友的回答^^
理論上是全都會有病徵,只是嚴重程度的差異而已,
在本篇lung用病毒方式 可能差異性會大一點
但在pancreas以pdx1-cre 應該是每隻都要,除非genotyping 錯誤或是發生其他突變。
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