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[討論] western blot menbrane裁切

看板Biotech (生命科學)作者 (平常心)時間15年前 (2010/10/30 20:51), 編輯推噓7(7推 0噓 9→)
留言16則, 11人參與, 最新討論串1/1
我真的覺得 手殘 ＝＝ 在裁menbrane時常歪掉 我們是用濕轉至的 因為我技術不是很好 再放gel或membrane時，不太正 或者是在趕氣泡時 會有點歪掉 導致 在transfer結束後 在裁menbrame時很容易手殘 （見算沒歪掉 也有手殘的紀錄＠＠） 想請問大家 在裁切membrane上有什麼技巧嗎 我是直接在marker上畫線 用尺下去平行 裁切 至於為什麼要裁切 因為要看兩個蛋白 加上internal control共三個 所以不太想用stripping 我看的事板分子量是70 跟36 在actine上的裁切就很尷尬 在marker 50跟35之間一歪掉就糗了 -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.71.89
推
10/30 21:08, , 1F
transfer後 請在membrane上描畫出膠的上下左右邊界
10/30 21:08, 1F
→
10/30 21:12, , 2F
以膠的邊界為準平移 並對準marker 做裁切,或換個有40多
10/30 21:12, 2F
→
10/30 21:12, , 3F
KD的marker來對了
10/30 21:12, 3F
推
10/30 21:39, , 4F
如果well數夠的話 會在sample的兩邊都load marker
10/30 21:39, 4F
→
10/30 21:40, , 5F
切的時候就拿直尺對兩邊marker切就萬事ok
10/30 21:40, 5F
推
10/30 21:52, , 6F
染 ponceau s 在切，比較不會歪！
10/30 21:52, 6F
→
10/30 22:44, , 7F
買個裁紙器.....
10/30 22:44, 7F
推
10/30 23:19, , 8F
染 ponceau s+1 染好再剪 絕對不會歪掉
10/30 23:19, 8F
推
10/30 23:56, , 9F
就marker要load 盡量跑開XD
10/30 23:56, 9F
→
10/31 00:46, , 10F
PONCEAUS S沒有染過耶 可是這樣對一抗 不會有影？想
10/31 00:46, 10F
推
10/31 01:07, , 11F
我會寧願跑開一點哩...不過ponceau s以前染過，看起來沒影響
10/31 01:07, 11F
→
10/31 03:06, , 12F
sample兩邊load marker，membrane放袋中，直尺對齊兩邊marker
10/31 03:06, 12F
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10/31 03:07, , 13F
在塑膠袋上畫線，用剪刀沿著線剪，不會歪...很直
10/31 03:07, 13F
推
10/31 10:24, , 14F
ponceau s不會有影響啊 用wash buffer洗到紅色退掉就好了
10/31 10:24, 14F
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10/31 10:25, , 15F
順便還可以看你transfer的效果怎麼樣
10/31 10:25, 15F
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11/08 14:58, , 16F
推mattmatt大,用裁紙器,而且要用滾輪刀的,不要鍘刀的
11/08 14:58, 16F
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