[求救] 冷凍包埋一問

看板Biotech (生命科學)作者 (科科 XX人生)時間15年前 (2010/11/16 12:34), 編輯推噓1(103)
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就我所知 冷凍包埋比較適合拿來作IHC 因此組織多半直接以OCT包埋後切片 而福馬林固定後以parafin包埋的組織較適合拿來觀察型態 我現在有個問題 因目前可使用的冷凍切片機最低溫只能到-20 而我組織屬於脂肪較多的組織 在這溫度切出來的片子 一些該有的型態排列有點類似受到擠壓的感覺 與其他人討論後 決定嘗試固定後冷凍包埋的方式切看看 參考咕狗後的結果 我從-80冰箱取frozen的組織以paraformaldehyde固定 o/n後 直接以OCT包埋 但切片結果發現 固定後的組織很容易切碎 不知有何更好得方法? 就我目前想到的解決方法 一些組織可用parafin固定 切片後用來觀察型態 但一些染色方式仍逃不掉要用冷凍切片才能染 請問 組織固定後冷凍包埋是否有其必要性? 又我的固定方式是否恰當? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.122.25

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碎裂可能是脫水不完全造成 書上建議的固定液跟組織體積比
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是10比一 另外就是組織冰在-80度 水的結晶可能會造成組織
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結構上的破壞 冷凍切片的優點就是可避免固定過程中抗原受
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影響而無法染色 但是否會受影響就要看您自身的實驗結果了
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文章代碼(AID): #1CuWdnsU (Biotech)
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