[求救] 菌長不起來
我要抽大量的plasmid
同一個plate,
剛transform後,同一批Amp,只是有配新的LB,
但LB powder是kit,1L/25g,配法沒變,
上次轉大量有成功,
有凍(500ul 50%glycerol+500ul菌)一管起來
我的plasmid是買來的,之前的經驗是,
DH5a transform後隨便挑都長,也都有表現,
最近,從4度C cold room拿plate出來,十天前transform的plate
挑一些,種小量4ml,有時候長,有時候不長QQ,
有變得非常混濁的時候,抽plasmid,有,digest, pattern ok
從原本小量裡面吸個20ul,轉到另一管小量,搖個八小時,不長QQ
拿原本那管,重新搖八小時,有變濁,轉大量(200ml+400ul),隔天又不長
想不出到底是啥原因,有人有這種奇怪的經驗嘛?
是因為從4度C一拿出來,要讓他wake up嘛?
還是我乾脆拿凍菌出來養?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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