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[求救] 請問關於T4 ligation

看板Biotech (生命科學)作者 (隱行)時間15年前 (2011/03/22 10:54), 編輯推噓3(3推 0噓 14→)
留言17則, 10人參與, 最新討論串1/1
因本人現在見習的實驗室是使用Promege T4 lagation kit 有一個問題很好奇 一般要ligation不是要用限制酶先切嗎? 切完才能ligation吧! 這個不用嗎? 還是說這個是限制酶和內切酶一起加進去 那這個要找出切點嗎？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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03/22 10:58, , 1F
不懂~ 不切還需要ligate嗎?
03/22 10:58, 1F
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03/22 11:08, , 2F
實驗室的人說 不用切 直接把要insert的DNA放入kit
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03/22 11:09, , 3F
這樣就會接合 我實在搞不懂 為何不用切
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03/22 12:20, , 4F
我想到是像TA cloning
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03/22 12:35, , 5F
同意樓上
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推
03/22 13:33, , 6F
去要一下說明書看看就知道了
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03/22 16:16, , 7F
是要接PCR產物進去對吧!
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03/22 19:10, , 8F
對是接PCR後的vector進去
03/22 19:10, 8F
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03/22 23:54, , 9F
看一下pGEM-T的protocol吧!
03/22 23:54, 9F
推
03/23 00:36, , 10F
說明書上有寫~~
03/23 00:36, 10F
推
03/23 12:06, , 11F
如果有T4 polymerase+T4 kinase+T4 ligase~就一次搞定~!
03/23 12:06, 11F
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03/25 05:44, , 12F
promega T4 ligate kit只有provide T4 ligase和buffer
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03/25 05:45, , 13F
不切怎麼接的進去~ 除非是他家另一個產品pGEM-T kit~
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03/25 05:46, , 14F
也是provide the same ligase and buffer
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03/25 05:46, , 15F
但有多一管vector (綠蓋蓋)
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03/25 05:47, , 16F
ㄟ不對! T4是綠蓋蓋, pGEM-T是黃蓋蓋才對~~ XDD
03/25 05:47, 16F
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03/25 05:48, , 17F
你看看你用的是哪種產品就知道囉~
03/25 05:48, 17F
※ 編輯: Johnpolo 來自: 114.32.49.184 (06/16 14:59)
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