[討論] 該如何讓細胞的訊息傳遞位於low level~

看板Biotech (生命科學)作者 (Phil-Ku)時間15年前 (2011/04/12 17:38), 編輯推噓1(104)
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最近在做訊息傳遞方面的實驗 希望能在加入FBS後看到細胞內RTK磷酸化程度增加,以及下游的訊息傳遞路徑有 Time-course的變化 一開始的流程大概是先將細胞放在FBS free的medium中 O/N 之後加入FBS,再計算時間收取蛋白跑WB 但卻很奇怪的發現,一直維持在FBS free的那組細胞,其RTK磷酸化程度比加入FBS後 30 mins、1 hour還高,重複幾次都是這樣 而其下游的訊息傳遞蛋白,例如Src、Akt等也都有類似的現象 因此想請問各位版友,有沒有過類似的情況呢? 如果需要看induce起來的現象,該如何讓細胞的訊息傳遞處於low level的狀態? (看來用FBS free的medium似乎不是正解) 當然starvation與signal transduction不是同一件事情,但這實在是讓我百思不得其解 感謝大家的意見與討論^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.121.97

04/13 17:19, , 1F
是什麼細胞? 有些細胞會受hormone刺激 要用charcoal-treated
04/13 17:19, 1F

04/13 17:20, , 2F
的medium和FBS 例如乳癌和攝護腺細胞
04/13 17:20, 2F

04/14 16:05, , 3F
目前是用HEK293細胞
04/14 16:05, 3F

04/17 10:55, , 4F
=.= 那就不清楚了 可能是細胞有問題? 建議用低代數的細胞
04/17 10:55, 4F

04/19 12:17, , 5F
感謝樓上 已經重新解凍stable clone 希望能有好結果XDD
04/19 12:17, 5F
文章代碼(AID): #1Df1sNGf (Biotech)
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