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[求救] 透析膜

看板Biotech (生命科學)作者 (車輪蛋糕:))時間14年前 (2011/06/24 22:42), 編輯推噓7(7推 0噓 4→)
留言11則, 7人參與, 最新討論串1/1
小弟有一批pichia表現的protein sup要作His select純化 原本想說sup過濾後通column即可 但和老師討論後瞭解應先透析後調整pH再過column 我的protein大概是14kDa 附近實驗室頂多能借到12KMWCO的透析膜 而朋友建議我用3.5kMWCO比較保險 不知道可否在台北哪邊化學材料行買到這樣的透析膜？ 因為週末想收下sup通column不想拖到下禮拜 還是有好心的版大願意分我一些T_T 感激不盡~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.131.9
推
06/25 01:35, , 1F
8K or 3K能用嗎? 你sample大概多少量
06/25 01:35, 1F
3K應該是可以用 8K 朋友說有點危險 如果protein folding的形狀比較特別就可能透出去 (= =a雖然我有點存疑)
推
06/25 12:24, , 2F
先透析是要去除鹽類嗎?還有請問調PH值的目的是什麼?
06/25 12:24, 2F
→
06/25 12:24, , 3F
最近也在做差不多的實驗 嘻嘻!
06/25 12:24, 3F
老闆說用冰PBS透析後 protein(我的是growth factor)在緩衝液裡面比較穩定 調pH是要調到pH8 這樣過nickel column binding比較好
推
06/25 12:44, , 4F
好奇 先透析是何用意？
06/25 12:44, 4F
推
06/25 15:29, , 5F
透析是要除去lysis buf裡的物質嗎???
06/25 15:29, 5F
恩..不是lysis buf耶 是yeast的supernatant 我想應該是要把一些yeast代謝廢物及氮源鹽類等減少(置換)成單純的PBS或ddH2O 以減少對nickel gel的干擾吧@@ ※ 編輯: harvey 來自: 140.112.131.9 (06/25 17:03)
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06/25 18:11, , 6F
那在透析的過程，除了溫度低 要怎麼避免protein degrade?
06/25 18:11, 6F
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06/25 20:49, , 7F
我有看過加protease inhibitor的protocol~
06/25 20:49, 7F
推
06/28 19:51, , 8F
農化新館這邊有 6-8K 的。1 cm 約 3 ml
06/28 19:51, 8F
推
06/28 19:55, , 9F
志德國際的透析膜也不錯。google 一下~
06/28 19:55, 9F
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06/28 19:55, , 10F
有現貨的老闆應該可以馬上幫你送~
06/28 19:55, 10F
推
08/16 13:12, , 11F
之前收yeast sup也都沒透析直接過column
08/16 13:12, 11F
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