Re: [討論] 為什麼HPLC要加低濃度蟻酸或乙酸
※ 引述《e5f6 (Youkon Disc)》之銘言:
: 我找了好多的PAPER的HPLC條件
: 所有BUFFER裡面都會加0.01%的蟻酸或是乙酸
: 可是我真的查不到原理
: 沒加會怎樣嗎?會損壞COLUMN嗎?
我猜可能是用reversed phase column ,C4、 C8、 C18、CN、phenyl這種的吧?
加formic acid 或是acetic acid 或TFA都是為了呈現酸性而已
有兩個原因
1. column裡中silica是怕鹼,所以流經的solvent必須至少是弱酸性
但這個原因也不是適用在各家各column,很多廠商有出可以耐pH很寬範圍的column了
2. 分析物的電荷穩定
像COOH,NH4+,讓化合物的電荷穩定,以大部分常出現的group中
用酸性是適當的,萬一有相當量的COO- 、NH3和他的COOH、NH4+共存的話
會看到圖中一個peak的頂端,有分成兩個小山坡,好像叫peak splitting?
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