[求救] 收磷酸化蛋白問題
我目前是在做病毒相關的實驗
用病毒感染細胞後收取蛋白看細胞的表現
最近因為實驗需求需要收磷酸化蛋白~做western
要看eI2a與PERK是否有被磷酸化現象
我的時間點有3、6、9、12、24、36、48小時時間點
我想請問有沒有人試過將細胞以PBS wash完後冰到-80度
之後再一起以RIPA buffer+protease phosphotase inhibitor收下
不知道這方法可不可行?
這樣對磷酸化蛋白會不會有所影響?
還是建議時間點到就單盤單盤收下之後放-80度?
麻煩有做收過類似時間點的人幫我解答一下
感謝萬分~
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