[求救] 如何維持medium的pH值?

看板Biotech (生命科學)作者 (冥煌 = 好硬)時間14年前 (2011/11/12 21:08), 編輯推噓3(307)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/1
我發現我的sample必須要在接近中性環境下才會有作用 因此希望下sample時DMEM的pH≒7.0 (之後在incubator內的變化可忽略) 不過medium在冰箱中總是會越放越鹼 (越來越紅) 有想過每次使用前調pH值,可是pH儀那根本身就是污染源了 也因為含有2% FBS,不能調好後再以0.22過濾 (會有很多protein loss) 除非我大量分裝,例如每瓶才25 mL medium 才能在每次使用前以「調pH --> 0.22過濾 --> 加FBS」處理 (我知道過濾會上升0.1~0.2,這沒關係還在可接受範圍) 但是這樣實在是太麻煩了......想請問各位有沒有方法 可以確保我在下sample時medium的pH≒7.0 感激不盡 :) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.218.89

11/12 22:08, , 1F
瓶口封parafilm會比較好嗎?避免CO2跑掉
11/12 22:08, 1F

11/12 22:15, , 2F
每次濾最好。用針跟小飛碟濾個一週用量。
11/12 22:15, 2F

11/13 00:12, , 3F
medium加HEPES 可以避免pH變動太大 配好大量之後分裝小量
11/13 00:12, 3F

11/13 00:13, , 4F
避免重複warm up和4度C
11/13 00:13, 4F

11/13 14:45, , 5F
請問樓上HEPES和NaHC03的濃度分別是?感謝回答 :)
11/13 14:45, 5F
※ 編輯: FireHell 來自: 140.112.218.89 (11/14 02:09)

11/14 20:15, , 6F
HEPES +1 我試過可以撐比較久 濃度是25mM
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11/15 08:08, , 7F
一般來說。.medium的buffer range應該都在7.2~7.4吧
11/15 08:08, 7F

11/15 08:08, , 8F
我們做的方式是你用25T flask.放進你的medium..
11/15 08:08, 8F

11/15 08:09, , 9F
直立放到incubator裡讓它equilibrate.
11/15 08:09, 9F

11/15 08:09, , 10F
但是有FBS的不要放太久(1week top)..要不然會變性.
11/15 08:09, 10F
文章代碼(AID): #1Elc_3Mz (Biotech)
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