[求救] 冷凍切片請教

看板Biotech (生命科學)作者 (阿ken)時間14年前 (2011/11/21 14:32), 編輯推噓1(104)
留言5則, 3人參與, 最新討論串1/1
各位大大好 小弟是初次做冷凍切片 最近有做一批大鼠皮膚切片用HE染切片厚度10um 切片的時候捲片很嚴重,而且片子常常破掉 切出來組織超級破碎的 我列出我實驗的步驟請各位多多指導一下 1. 切下來的組織直接用OCT包埋(-20度) 2. 泡水去除OCT 3. 浸泡Moyer's Hematoxylin 2分鐘。 4. 置於清水中水洗5至10分鐘。 5. 置入Eosin Y溶液10秒鐘。 依序浸於50 %、70 %、85 %、95 %、100 %的酒精中脫水,最後浸入 二甲苯溶液3至5分鐘後,以固定膠(Xylene Substitute Mountant)封片。 小弟並不是生物背景 所以第一次做這個很吃力 請各位大大指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.135.98.169

11/21 16:56, , 1F
Eosin之後用50%的酒精, 可能會把Eosin的顏色褪掉不少喔
11/21 16:56, 1F

11/21 19:02, , 2F
包埋時建議把皮毛充分抹滿OCT 另外我是會把皮對折包進去
11/21 19:02, 2F

11/21 19:04, , 3F
這樣一片裡能看的地方會比較多也比較好切 10um更好切
11/21 19:04, 3F

11/21 19:06, , 4F
反正重點就是OCT要填滿空隙 這樣就不會捲&破了 (我的情況
11/21 19:06, 4F

11/21 23:20, , 5F
嗯?組織完全不用固定就直接切?
11/21 23:20, 5F
文章代碼(AID): #1EoV2Aun (Biotech)
文章代碼(AID): #1EoV2Aun (Biotech)