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[討論]DNA ligation時 260/280的值重要嗎?

看板Biotech (生命科學)作者 (紫)時間14年前 (2011/11/24 20:57), 編輯推噓3(3推 0噓 5→)
留言8則, 4人參與, 最新討論串1/1
如題 我做cloning一直做不出來 我認為最大的原因應該在ligation的部分 有看到一些protocol說 ligation前 最好先將sample做clean up的動作 所以我想問 DNA的純度會影響到ligation的效果嗎? 260/280 的值低於1.8就不能做ligation? 那260/230的值也要考慮進去嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.122.198.26
推
11/24 21:09, , 1F
純度會影響，ligation的條件需求蠻嚴格的
11/24 21:09, 1F
→
11/24 21:10, , 2F
不過我看過的case中，通常是enzyme沒切好才接不起來
11/24 21:10, 2F
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11/24 21:12, , 3F
260/280也會受到DNA濃度影響，我只當作參考
11/24 21:12, 3F
推
11/24 22:43, , 4F
切完 P完 ligation前 都會clean up阿 所以你都沒做?
11/24 22:43, 4F
推
11/25 10:45, , 5F
額外 添加 新的 ATP
11/25 10:45, 5F
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11/25 16:26, , 6F
clean up是都有做的 只是 我做完之後 看260/280的值
11/25 16:26, 6F
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11/25 16:26, , 7F
好像沒有到很標準的程度 所以才會問 是不是DNA的品質
11/25 16:26, 7F
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11/25 16:27, , 8F
不夠好會影響到ligation的結果
11/25 16:27, 8F
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